Не позднее чем через 1 ч после эякуляции разжиженный эякулят тщательно перемешивают, избегая пенообразования. Каплю эякулята наносят на чистое сухое предметное стекло, подогретое до 20—25°С, накрывают покровным, следя за тем, чтобы между стеклами не попадали пузырьки воздуха, и изучают нативный препарат под микроскопом при увеличении 200Х или 400 X.
Сперматозоиды — преобладающие элементы эякулята. Они представляют собой длинные клетки (58—67 мкм) со жгутиками. В них различают три части: головку, шейку и хвост.
Головка сперматозоида овальной формы, сплюснутая в переднезаднем направлении, с заостренным передним концом. Большая часть головки занята ядром, хроматин которого состоит из 23 хромосом. Цитоплазма окружает ядро в виде тонкой оболочки.
Шейка — наиболее тонкая часть сперматозоида. Хвост сперматозоида также тонкий, длиной 50—60 мкм.
При отсутствии в нативном препарате сперматозоидов эякулят центрифугируют при 3000—4000 об/мин в течение 5—10 мин. Из осадка готовят нативные препараты и исследуют их под микроскопом, устанавливая наличие или отсутствие сперматозоидов или клеток сперматогенеза, их среднее количество в одном поле зрения, характер подвижности. При наличии сперматозоидов препараты высушивают, окрашивают и исследуют спермограмму.
При различных заболеваниях половых желез (простатит и пр.) может наблюдаться агглютинация сперматозоидов в нативных препаратах, которая оценивается следующим образом:
склеивание единичных сперматозоидов— «+»;
половины сперматозоидов только головками — «++»;
половины сперматозоидов и головками, и хвостами — «+++»;
почти всех сперматозоидов — «++++».
Поддерживающие клетки извитых семенных канальцев (клетки Сертоли) встречаются редко (в 5 % всех эякулятов).
Клетки сперматогенеза (сперматогонии, сперматоциты, сперматиды) в нормальном эякуляте составляют 0,5— 2 %. Большое их количество наблюдается при секреторном бесплодии.
Эритроциты в норме отсутствуют или встречаются единичные в препарате. При ранениях, воспалительных процессах и другой патологии может обнаруживаться большое количество эритроцитов — гемоспермия.
В норме эякулят содержит единичные лейкоциты. Большое количество лейкоцитов в эякуляте — пиоспермия — наблюдается при туберкулезе, гонорее, а также неспецифических воспалительных процессах в семенных пузырьках, предстательной железе и др. При пиоспермии показано окрашивание мазков по Граму и Цилю—Нельсену. При обследовании мужчин по поводу бесплодия обязателен посев эякулята для выявления его микрофлоры и определения ее чувствительности к антибиотикам.
При обнаружении в эякуляте значительного количества лейкоцитов, эритроцитов и других патологических элементов необходимо выполнить дробный анализ эякулята. Более чем у 90 % мужчин наблюдается следующая последовательность выделения компонентов при эякуляции:
Учитывая эти данные, можно установить или с большой вероятностью предположить источник наличия в эякуляте эритроцитов, лейкоцитов и других патологических примесей, а порцию, содержащую наибольшее количество активно-подвижных сперматозоидов, использовать для супружеского искусственного осеменения.
В нормальном эякуляте может обнаруживаться в незначительном количестве призматический эпителий глубоких участков мочеиспускательного канала и протока придатка яичка, а также эпителий предстательной железы (редко).
При воспалительных процессах эпителий предстательной железы может обнаруживаться в эякуляте в значительном количестве в виде круглых мелких белесоватых клеток с выраженной жировой дистрофией. Располагаются такие клетки разрозненно и группами, нередко образуя с лейкоцитами бесформенные распадающиеся массы, среди которых можно различить только отдельные четкие клетки.
Эпителий из семенных пузырьков часто содержит темные включения.
При патологических процессах могут усиленно слущиваться клетки эпителия, которые в норме в эякуляте не обнаруживаются. Так, при неспецифическом уретрите в эякулят попадают в значительном количестве клетки из ладьевидной ямки мочеиспускательного канала (многослойный плоский эпителий с признаками пролиферации, дегенерации и ороговения), а при гонорейном и травматическом эпидидимите — из вышерасположенных участков семявыводящих путей — придатка яичка.
Гигантские многоядерные клетки инородных тел, или клетки хронического воспаления, имеют диаметр до 50 мкм и более, округлые, содержат от 6 до 30 и более мономорфных, беспорядочно расположенных ядер. Ядрышки выражены не всегда. Цитоплазма клеток базофильная, четко очерченная, может содержать мелкие включения.
Макрофаги в эякуляте имеют разные размеры. Характерной особенностью их является наличие в цитоплазме различных включений. Макрофаги, фагоцитирующие сперматозоиды, имеют диагностическое значение, их называют сперматофагами. Это круглые большие клетки диаметром 20—36 мкм со светлой, нередко вакуолизированной цитоплазмой и одним или несколькими ядрами. В цитоплазме клеток удается рассмотреть головки фагоцитированных сперматозоидов. По периферии сперматофагов нередко видны выступающие хвосты сперматозоидов.
Макрофаги обнаруживаются при воспалительных процессах, а сперма- тофаги — чаще всего при застое эякулята различного происхождения (длительное половое воздержание, облитерация семявыносящего протока и других).
С секретом предстательной железы в эякулят попадают неклеточные элементы — кристаллы Беттхера, зерна липидов (лецитиновые зерна), амилоидные тельца (конкременты).
Зерна липидов — это мелкие матовые образования округлой формы. В нормальном эякуляте содержатся в значительном количестве. При простатите количество их уменьшается, иногда вплоть до полного исчезновения.
Кристаллы Беттхера бесцветные, удлиненной формы, образуются при охлаждении и высыхании эякулята, окрашиваются раствором Люголя в темно-синий цвет. Чем сильнее выражена гипоспермия, тем быстрее и в большем количестве образуются эти кристаллы, особенно характерно их появление для простатита.
Амилоидные тельца — образования овальной формы с характерным слоистым строением, желтого цвета. Центральная часть их может быть мелкозернистой. Образуются при застое секрета предстательной железы.
Слизь в нормальном эякуляте отсутствует. При простатите или везикулите в эякулят попадает большое количество густой липкой слизи, которая обволакивает сперматозоиды и обусловливает их неподвижность.
При микроскопии нативного препарата лейкоциты, эритроциты, клетки сперматогенеза, агглютинацию, зерна липидов, амилоидные тельца выражают в количестве на одно поле зрения. При необходимости все перечисленные элементы эякулята подсчитываются, как сперматозоиды, в камере Горяева, что позволяет врачу-клиницисту оценивать эффективность лечения воспалительных заболеваний мужских половых органов.